陈献稿个人博客

中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局 中国国家标准化管理委员会

2007-06-26发布，2007-10-01实施

前言

本标准的第5章和第7章为强制性的，其余为推荐性的。

本标准由中华人民共和国农业部提出。

本标准由全国水产标准化技术委员会淡水养殖分技术委员会归口。

本标准起草单位:湖南师范大学生命科学学院、湖南省畜牧水产局。

本标准主要起草人:张轩杰、刘箔、周工健、罗深、张球保、姚占州。

中华鳖GB 21044-2007

1范围

本标准规定了中华鳖(Pelodiscus sinensis Wiegmann)的主要形态构造特征、繁殖特性、遗传学特性和检测方法。

本标准适用于中华鳖的种质检测与鉴定。

2规范性引用文件

下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。

GB/T 18654. 1养殖鱼类种质检验第1部分:检验规则

GB/T 18654. 12养殖鱼类种质检验第12部分:染色体组型分析

3术语和定义

下列术语和定义适用于本标准。

3.1 背甲长carapace length

背甲(中线)前缘至背甲后缘的直线距离。

3. 2 背甲宽carapace width

左边韧带外侧缘到右边韧带外侧缘的直线距离。

3. 3 体高body highness

鳖体中部的垂直高度。

3. 4 后侧裙边宽back apron width

尾基部上方裙边宽度。

3. 5 吻长proboscis length

上领前缘(主鼻孔管)长度。

3. 6 吻突长soft proboscis length

鼻孔前端无骨部分长度。

3. 7 吻突宽soft proboscis width

吻端最大宽度。

3. 8 眼间距 the distance between eye to eye

两眼眶上缘之间的距离。

4学名与分类

4.1学名

中华鳖Pelodiscus sinensis Wiegmann。

4.2别名

甲鱼、团鱼、水鱼、王八、脚鱼等。

4. 3分类位置

脊索动物门(Chordata)、脊椎动物平门（Subphylum Vertebrata)、爬行纲(Reptilia)、龟鳖目(Chelonia)、鳖科(Trionychidae)、鳖属(Pelodscus)。

5主要形态构造特征

5.1.1 外形

外形扁平，呈椭圆形，体背、腹有骨质硬甲，鳖体周围有胶质裙边，背部暗绿或暗褐色，部分有花斑。表皮上有突起小疣和隆起纵纹。腹部灰白或黄白色，长江三角洲地区的中华鳖腹部有黑色斑块。头尾及四肢伸展在硬甲之外，遇敌受惊时可缩于硬甲。中华鳖的外形见图1.

5.1.2头

背面呈尖三角形，中央微凹，两侧稍隆起，吻端延长成管状，形成鼻孔管，位于吻突前端，口大，其口裂向后伸达眼后缘，上下颌无齿，具锋利的胶质鞘，很小，瞳孔圆形，有眼脸和瞬膜，可开闭。

5.1.3颈

粗长，圆筒形，可灵活转动，遇险时呈“S”形收缩于硬甲内。

5.1.4身区干

背腹各有一块甲板，背甲卵圆形，稍弓起，覆以柔软革质皮肤，中央稍凹，两侧稍隆起，具突起纵纹和小优突;腹甲小于背甲，不完整，较平坦，背腹部在两侧以韧带相连，背甲中后部边缘具有发达的结缔组织，即裙边。

5. 1.5四肢

四肢粗短扁平，五趾型，有爪，前后肢内侧三趾有外露的爪，外侧两趾有爪但不外露，趾间蹼厚而发达，后肢比前肢粗长。

5. 1 .6尾

呈锥形，在腹面有纵裂形泄殖孔，成熟雄鳖尾部粗硬且较长，伸出裙边之外，成熟雌鳖尾较松软且较短，不露或微露出裙边。

5.2可量性状

中华鳖(2龄以上)主要可量性状比例。

5.3 内部特征

5.3.1消化系统

口位于头部腹面，上下颌无齿，边缘有坚硬的角质鞘，口腔内有舌，呈三角形，舌上有倒生的锥形小突起，消化道中部稍膨大，没有明显的胃，消化道总长不超过背甲长的3倍—4倍。肝分两叶，右叶肥厚。左叶分为三小叶，胰腺浅红色，呈条形。

5.3.2骨骼系统

骨骼包括外骨骼和内骨骼。外骨骼包括背甲和腹甲，背甲由一块肩板，八块椎板和八对肋板组成，个别为九肋，腹甲由九块骨板组成，内骨骼包括头颅骨、脊椎骨、颈椎、尾脊骨和四肢骨。

5.3.3呼吸系统

肺呼吸，肺为一对浅黑色的微膜囊。咽部有筛状辅助呼吸器官。

5.3.4 泌尿和生殖系统

肾呈叶状。泌道腹壁有膀胱，膀胱两侧有一对副膀胱。通过输尿管开口于泄殖腔，雌性生殖系统由卵巢，输卵管和泄殖腔孔等组成；雄性生殖系统由精巢、输精管、泄殖腔孔、交配器等组成。

6繁殖特性

6.1性成熟年龄

长江流域雌雄鳖的性成熟年龄为四冬龄。

6. 2产卵期

5月份至8月份为产卵期，6月份至7月份为产卵盛期。

6.3产卵期

体重0. 75 kg–1. 0kg的雌鳖每年可产卵30个–70个，一般每年产3次–5次，每次产8个–15个。

6. 4卵形

卵圆形，有卵壳，卵清无系带。

7遗传学特性

7.1细胞遗传学特性

7.1.1体细胞染色体数:2n=66。

7. 1. 2组型:中部着丝粒染色体2对，亚中部着丝粒染色体4对，端部着丝粒染色体8对，点状染色体19对。染色体臂数(NF) 78。中华鳖的染色体组型见图2 b) 。

7. 2生化遗传学特性

中华鳖肌肉乳酸脱氢酶(LDH)同工酶有5条酶带，见图3。

8检测方法

8. 1性状检测

用经计量检定部门检定的量具测量背甲长、背甲宽、体高、后侧裙边宽、吻长、吻突长、吻突宽和眼间距。

8. 2染色体测定

8. 2. 1预处理和低渗

选择健壮的成体雄鳖，从其后肢基部注射植物血球凝集素5 μg/g, 30℃培育12 h，再注射秋水仙素2μg/g,3 h后解剖取出骨髓和精巢，用生理盐水((0.7%)洗涤并除杂、剪碎，加少许生理盐水移人离心管中，用吸管反复吹打至细胞分散，静置10 min。取细胞浮液离心后加低渗液(0. 075 mol/L的氯化钾)处理50 min。

8. 2. 2固定

移去低渗液，加人新鲜配制的卡诺氏固定液(乙醇，冰醋酸为3 ：1)在室温下固定2次，每次50 min。

8. 2. 3染色体标本的制法、染色、计算和组型分析

按GB/T 18654. 12的规定执行。

8. 3生化遗传分析

8. 3. 1样品制备

剪断颈动脉放血，活体解剖，取后肢肌肉，按1:5的比例加人4 °C磷酸缓冲液匀浆，12 000 r/min离心30 min，取上清液置冰箱保存备用。

8. 3. 2电泳分离

电泳使用垂直平板电泳仪进行，15%–30%聚丙烯酰胺梯度胶分离。凝胶、电极缓冲液均为pH7. 0的TC (Tris 16. 35 g、柠檬酸9. 04 g，加蒸馏水1 000 mL配制。使用时，凝胶缓冲液稀释4倍，电极缓冲液稀释6倍)缓冲系统。电泳后37℃保温染色。电泳结果用凝胶成像分析系统进行扫描，得到酶谱和扫描图谱。

9检验规则与结果判定

按GB/T18654. 1的规定执行。